دانشگاه آزاد اسلامی
واحد علوم دارویی
پایان نامه
جهت دریافت درجه دکتری داروسازی
موضوع
بررسی متابولیسم داروی نوسکاپین در سلولهای
مجزای کبد موش
....................................................................
فهرست مطالب
عنوان صفحه
چکیده پایان نامه
بخش اول: مقدمه
مقدمه......................................................................................................................
1-1- اوپیوییدها.......................................................................................................
1-1-1- تاریخچه.....................................................................................................
1-1-2- آلکالوییدهای تریاک.....................................................................................
1-1-3- پپتیدهای اوپیویید درون زاد..........................................................................
1-1-4- آثار اوپیوییدها بر اعضای مختلف..................................................................
1-1-5- مصارف بالینی اوپیوییدها..............................................................................
1-2- متابولیسم........................................................................................................
1-2-1- تاریخچه.....................................................................................................
1-2-2- کلیات متابولیسم..........................................................................................
1-2-3- مکان های متابولیسم داروها..........................................................................
1-2-4- عوامل تعیین کننده سرعت تغییر شکل زیستی.................................................
1-2-5- تکنیک های تجربی بررسی متابولیسم............................................................
1-2-6- کاربرد و اهمیت بررسی متابولیسم.................................................................
1-3- جداسازی سلولهای کبد....................................................................................
1-4- روش های مطالعه شده برای شناسایی و اندازه گیری نوسکاپین و متابولیت هایش..
1-5- کلیاتی درباره کروماتوگرافی و HPLC..............................................................
1-5-1- تاریخچه.....................................................................................................
1-5-2- اساس کروماتوگرافی....................................................................................
1-5-3- فازهای متحرک و ساکن در کروماتوگرافی مایع..............................................
1-5-4- کروماتوگرافی مایع با کارآیی بالا..................................................................
1-5-5- اساس دستگاه HPLC..................................................................................
1-6- نوسکاپین........................................................................................................
1-6-1- برخی اثرات نوسکاپین.................................................................................
1-6-2- فارماکوکینتیک نوسکاپین..............................................................................
1-6-3- مروری بر روند متابولیسم نوسکاپین..............................................................
بخش دوم: روشها و مواد
2-1- اهداف مطالعه..................................................................................................
2-2- دستگاه ها و وسایل ........................................................................................
2-3- مواد...............................................................................................................
2-4- تهیه بافرهای پرفیوژن.......................................................................................
2-4-1- محلول Stock بافر هنکس با غلظت 10 برابر.................................................
2-4-2- محلول Stock بافر کربس- هنزلیت با غلظت 2 برابر......................................
2-4-3- بافر هنکس یک...........................................................................................
2-4-4- بافر هنکس دو............................................................................................
2-4-5- بافر کربس آلبومین......................................................................................
2-4-6- بافر کربس- هپس.......................................................................................
2-5- تهیه محلول کلاژن و کوت کردن پلیت 6خانه.....................................................
2-6- محیط کشت...................................................................................................
2-6-1- مراحل تهیه محیط کشت: (1:1) DMEM, F12................................................
2-7- سرم جنین گاو (FBS).....................................................................................
2-8- کیت استریل پرفیوژن.......................................................................................
2-9- تهیه هپاتوسیت های تازه..................................................................................
2-9-1- نگهداری سلولهای به دست آمده از کبد موش................................................
2-9-2- بررسی حیات سلولی و نحوه اثر دادن دارو روی سلولهای جدا شده از کبد موش.............
2-9-3- تهیه نمونه برای انجام آنالیز...........................................................................
2-10- روش سنتز مکونین (6 و 7- دی متوکسی فتالید)..............................................
2-11- دلایل انتخاب HPLC....................................................................................
2-11-1- مشخصات دستگاه HPLC.........................................................................
2-11-2- انواع روش های HPLC آزمایش شده.........................................................
2-11-3- روش تهیه بافر 10X استات با 4 pH=........................................................
2-11-4- روش تهیه بافر فسفات سدیم Mm 25 با 5/4 pH=......................................
2-12- استخراج متابولیت از ادرار انسان.....................................................................
بخش سوم: نتایج
3-1- جداسازی سلولهای کبد....................................................................................
3-2- سنتز مکونین...................................................................................................
3-3- روش کروماتوگرافی با کارکرد عالی (HPLC)....................................................
بخش چهارم: بحث و نتیجه گیری
4-1- جداسازی سلول های کبد موش........................................................................
4-2- روش کروماتوگرافی با کارکرد عالی (HPLC)....................................................
4-3- متابولیسم نوسکاپین.........................................................................................
4-4- متابولیسم نوسکاپین در ادرار انسان....................................................................
خلاصه انگلیسی.......................................................................................................
منابع........................................................................................................................
اختصارات...............................................................................................................
پایان نامه : بررسی متابولیسم داروی نوسکاپین در سلولهای مجزای کبد موش