دانلود مقاله کشت گردو و موانع پیش رو

اختصاصی از نیک فایل دانلود مقاله کشت گردو و موانع پیش رو دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

مشخصات این فایل
عنوان:کشت گردو و موانع پیش رو
فرمت فایل : word( قابل ویرایش)
تعداد صفحات: 23

این مقاله درمورد کشت گردو و موانع پیش رو می باشد.

خلاصه آنچه در مقاله کشت گردو و موانع پیش رو می خوانید :

اهمیت و اهداف این تحقیق:
همانطور که در قبل نیز ذکر گردید تاکنون بیماری شانکر سیتوسپورایی که دو فقط از مناطق محدودی از  کشور شامل استانهای اصفهان، آذربایجان شرقی ، آذربایجان غربی و مرکزی گزارش و شناسایی گردیده است. با توجه به اهمیت گردو از نظر ارزش غذایی، صادراتی و صنعتی آن و افزایش سطح زیر کشت گردو که در سالهای اخیر در اکثر استانهای کشوری کاشت گردو بخصوص ارقام جدید توسعة زیادی پیدا کرده و مشکلات عدیده‌‌ای نیز در این استانها روی گرد و مشاهده می‌شود، این ضرورت احساس می گردد که تمام نشاط کاشت گردد در ایران مورد بازدید قرار گرفته و در نقاطی که شانکرسیتوسپورایی مشاهده می‌شود اقدام به جداسازی و شناسایی گونه‌ها گردد.
اگر چه اسمیت خسارات ناشی از شانکر سیتوسپورایی در نقاط مختلف کشور متفاوت ذکر گردید ولی باید نکات مهمی در این رابطه مد نظر قرار گیرند که عبارتند از:
گونه های مختلف سیتوسپورا بیماری‌زایی متفاوتی داشته و اهمیت همة‌گونه ها از نظر بیماری زایی یکسان نیست و بنابراین شناسایی گونه‌ها در تشخیص میزان و نوع خسارت روی گرد و مهم است بخصوص که ذکر گردیده است در شرایط آزمایشگاهی گونه‌های متعددی از اعضاء این شبکه جنس روی گردو بیماریزا هستند مانند C. ambiens
2- در داخل هر گونه نیز نژادهای مختلفی  وجود دارد که از نظر بیماری‌زایی متفاوت هستند و ممکن است یک گونه در یک منطقه خسارت زیادی وارد کند و در منطقة دیگر کمتر که این می‌تواند بعلت وجود نژادهای مختلف قارچ باشد.
3- با افزایش سطح زیر کشت گردو در مناطق مختلف نیز شیوع بیماری بخاطر افزایش در جمعیت میزبان توسعه پیدا کرده و گاهاً در مناطقی که این بیماری مشاهده شده یا بصورت اندمیک مشاهده می‌گردید امروزه خود را کاملاً نمایان سازد.
4- ارقام مختلف گردو که در مناطق مختلف کاشته می‌شود و نیز حساسیت‌های متفاوتی را در مقابل گونه‌ها و نژادهای بیماریزا از خود نشان می‌دهند.
5- شرایط محیطی و اقلیمی محل می‌تواند تأثیر مهمی روی بیماری داشته و باعث می‌شود که اهمیت بیماری از منطقه ای به منطقة دیگر فرق کند. علاوه بر این گونه های متفاوت قارچ عامل بیماری نیز تحت تأثیر شرایط محیطی و اقلیمی قرار می‌گیرند که در هر منطقه با توجه به نوع شرایط محیطی و اقلیمی گونة خاصی نسبت به بقیة‌گونه ها اهمیت بیشتری از نظر ایجاد بیماری پیدا می‌کند.

با توجه به نکات بالا ضرورت بررسی وجود بیماری شانکرسیورایی گردو و شناسایی گونه‌های مهم  از نظر بیماری‌زایی در تمام نقاط گردو کاری کشور مشخص می‌گردد که بطور خلاصه اهداف این طرح به شرح زیر است:
الف: بازدید از مناطق کاشت گردو در استانهای مختلف کشور و بررسی وجود بیماری در این مناطق.
ب: جداسازی عامل بیماری‌ از مناطق آلوده و شناسایی گونه‌ها در هر منطقه به تفکیک اهمیت و پراکنش.
7- مواد و روش‌های تحقیق:
1) بازدید و نمونه‌برداری: در این تحقیق از مناطق عمدة کاشت گردو و در  استان‌های مختلف کشور بازدید و در صورت مشاهدة علائم بیماری‌ از مناطق آلوده چندین شاخه همراه با استروما و فتیله‌های تشکیل شده توسط قارچ جمع‌آوری و با ذکر محل نمونه‌برداری، تاریخ جمع‌آوری و دیگر مشخصات جست جداسازی قارچ و انجام مراحل بعدی به آزمایشگاه منتقل می‌گردد. بعلت نبود اطلاعات کافی در مورد زمان آلودگی و بهترین زمان جست نمونه‌برداری و جداسازی قارچ بیشتر نمونه‌ برداری‌ها در فصل بهار و تابستان صورت خواهد گرفت و در صورت نیاز به مجدد در فصول دیگر اقدام خواهد شد.
2) جداسازی عامل بیماری: جداسازی عامل بیماری به دو صورت عمده صورت خواهد گرفت.
الف: کشت قطعات گیاهی آلوده: در این روش شاخه های آلوده را به بخش‌های کوچکی تقسیم و قطعاتی از پوست درخت در مرز بین نواحی آلوده و سالم را جدا کرده و پس از ضدعفونی سطحی توسط هپوکلریت سدیم 10% یا الکل اتیلیک 70% به مدت یک دقیقه قطعات حاصله را خشک کرده و روی محیط کشت PDA کشت داده می‌شوند.
ب: کشت سوسپانسیون اسپورهای حاصل از فتیله‌ها یا استرومای قارچ: در این روش در صورتی که قارچ فتیله یا استرومای تازه تولید کرده باشد مقداری از فتیله را در آب مقطر استریل حل کرده تا سوسپانسیون نسبتاً غلیظی از اسپور قارچ بدست آید. سپس چند قطره از سوسپانسیون حاصله توسط نوک سوزن یا اسکالیل سترون روی محیط کشت PDA پخش کرده و در انکوباتور نگهداری تا کلنی قارچ ظاهر گردد. در روش دیگر می‌توان چند میلی‌لیتر از سوسپانسیون حاصله را به محیط کشت آب آگار WA منتقل و پس از انکوباسیون به مدت 24 تا 48 ساعت چندین اسپور جوانه‌ زده را با سوزن سترون جدا و هم محیط کشت PDA منتقل می‌گردند.
3) خالص‌سازیک خالص سازی به روش تک اسپور کردن صورت می‌گیرد. بدین منظور جدایه‌های بدست آمده توسط کشت مستقیم اندامهای آلودة گیاهی را برای مدت کافی در انکوباتور نگهداری تا قارچ تولید استروما و کنیدی نماید. سپس از کنید‌های حاصله سوسپانسیون رقیقی در آب مقطر سترون تهیه و به محیط کشت آب آگار WA منتقل و پس از انکوباسیون به مدت 24 تا 48 ساعت یک اسپورجوانه‌زده را توسط سوزن به محیط کشت جدید منتقل و پس از انکولاسیون به مدت 24 تا 48 ساعت یک اسپور جوانه زده را توسط سوزن به محیط کشت جدید منتقل نموده تا کلنی‌های حاصل از رشد تک اسپور بدست آید. در مورد نمونه‌های تازه‌ای که درصد جوانه‌زنی اسپورها خیلی زیاد باشد جداسازی و خالص‌سازی مستقیماً به همین روش صورت خواهد گرفت.
4) محیط کشت‌های مورد استفاده:
الف: محیط کشت سیب‌زمینی- دکستروز- آگار PDA: بصورت آماره ساخت شرکت MERCK تهیه و استفاده می‌گردد.
ب: محیط کشت عصارة مالت به آگار MA: بصورت آماده ساخت شرکت DIFCO تهیه و استفاده می‌گردد.
ج: محیط کشت عسل- پیتون- آگار HPA: مقدار 20 گرم آگار را به همراه 10 گ رم پیتون و 60 گرم عسل به یک لیتر آب اضافه و سپس سترون می‌گردد.
در صورتی که جدایه های بدست آمده روی این محیط کشت‌ها اسپورزایی ننمایند ممکن است مقداری از چوب میزبان یا چوب یا ساقه‌های گیاهان علفی دیگر بصورت خاک اره به محیط کشت‌های فوق‌الذکر اضافه گردند تا قارچ در این محیط‌ها تولید اسپور نماید.
5) بررسی‌های آزمایشگاهی و میکروسکوپی:
الف: بررسی‌های ماکروسکوپی: در این مرحله رنگ، شکل و نحوة رشد کلنی جدایه‌های مختلف در محیط کشت‌های متفاوت در آزمایشگاه مورد مطالعه قرار می‌گیرد. همچنین دمای بهینه و دامنة دمایی از نظر رشد کلنی جدایه‌های متفاوت نیز تعیین تا در صورت لزوم در تشخیص گونه‌ها مورد استفاده قرار گیرد.

شکل C اندازه و رنگ فتیله‌ها و استروما در طبیعت نیز یادداشت‌برداری و بعلاوه در صورت لزوم در آزمایشگاه شاخه های گردو به قطر 5/1 تا 2 سانتی‌متر و طول حدود 15 سانتی‌متر تهیه و جدایه‌های مختلف را طبق منبع شمارة . . . .  به این شاخه‌ها مایه‌زنی کرده تا قارچ تولید استروما و فتیله نموده و با نمونه‌های طبیعی مورد مقایسه و جهت تشخیص گونه استفاده می‌گردد.
ب: بررسی‌های میکروسکوپی:
ب-1): مطالعه اسپودها و سلولهای زایندة‌ کنیدی: در این مرحله شکل، رنگ و اندازة کنیدیوم‌ها و سلول‌های زایندة کنیدیوم زیر میکروسکوپ نوری تعیین می‌گردد که بین منظور مقداری از استرومای قارچ روی شاخه‌ها را برداشته و پس از خرد کردن روی لام و میکروسکوپی کردن آنها مشاهدات صورت می‌گیرد. همچنین تمامی موارد بالا برای استروماهای تولید شده توسط هر قارچ روی محیط کشت نیز یادداشت برداری و جهت مقایسه بکار خواهد رفت.
ب-2): مطالعة استروما: از استروماهای تولید شده روی چوب میزبان بر شمایی عرضی و طولی تهیه و جهت تعیین تعداد حفره‌ها، تعداد امتیول و تعداد لایه های تشکیل دهندة حفره‌ها و شکل و اندازه و رنگ این سلولها مورد بررسی قرار می‌گیرد. این برش‌ها ممکن است مستقیماً توسط تیغ اسکالیل و دست تهیه گردند یا در صورت لزوم از دستگاه میکروتوم انمادی استفاده گردد که باید مراحل و مواد مورد استفاده بطور تجربی بهینه گردد که بدین علت از ذکر جزئیات بیشتر اجتناب می‌گردد.
6) شناسایی و تشخیص گونه: پس از بدست آوردن کلیة‌ خصوصیات مورد استفاده در تشخیص گونه ها شامل رنگ فتیله‌ها، شکل استروما، رنگ استروما، شکل و اندازة‌ کنیدی‌ها و سلولهای زایندة کنیدی، تعداد حفرات استروما، تعداد استیول، اندازة استروما و غیره در آزمایشگاه جدایه‌های بدست آمده طبق  کلید منبع شماره مورد بررسی و شناسایی قرار خواهند گرفت. در صورت دست‌یابی به کلیدهای شناسایی جدیدتر نیز مقایسه‌ای بین کلیدهای متفاوت انجام داده و بهترین گزینه و یا تلفیقی از چند  کلید جست شناسایی استفاده خواهد شد.

بخشی از فهرست مطالب مقاله کشت گردو و موانع پیش رو

مقدمه
2- خصوصیات گیاه‌شناسی گردو
3- اهمیت و گسترش قارچهای شبه جنس Cytospora
4- ویژگی‌های شبه جنس Cytospora
5- بررسی بیماری شانکرسیتو پسورایی یا فتیله نارنجی گردو در ایران:
6- اهمیت و اهداف این تحقیق:
7- مواد و روش‌های تحقیق:
ب: بررسی‌های میکروسکوپی: